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干貨分享:細(xì)胞培養(yǎng)板細(xì)胞布不均勻原因及處理措施
BUNSEN本生細(xì)胞培養(yǎng)板與酶標(biāo)板的區(qū)別:
首先:都用多孔培養(yǎng)板測(cè)吸光度肯定可以,可以用它來做樣品的蛋白定量和MTT檢測(cè)。
區(qū)別:酶標(biāo)板一般要比細(xì)胞培養(yǎng)板貴,細(xì)胞板主要做細(xì)胞培養(yǎng),但也可以用來測(cè)蛋白濃度;酶標(biāo)板包括包被板和反應(yīng)板,一般不能用做細(xì)胞培養(yǎng),它主要做免疫酶聯(lián)反應(yīng)后的蛋白檢測(cè),它需要更高的要求還需要特定的酶標(biāo)工作液。
BUNSEN本生細(xì)胞培養(yǎng)板細(xì)胞布不均勻的原因和處理措施:
先要搞清細(xì)胞是如何混勻的,是滴管吹打還是振蕩培養(yǎng)板,如果是后者,而且是轉(zhuǎn)圈搖勻的話,很有可能由于離心力的作用使細(xì)胞甩到周邊部分,導(dǎo)致細(xì)胞中間少,四周多。
當(dāng)然,也有可能是培養(yǎng)板的質(zhì)量問題或是鋪板時(shí)細(xì)胞密度太低。對(duì)此可在培養(yǎng)種板之前,把培養(yǎng)板放入培養(yǎng)箱里進(jìn)行幾個(gè)小時(shí)的飽和后再取出,種入細(xì)胞時(shí)力量要輕,可采取用滴頭在培養(yǎng)板孔的側(cè)面慢慢加入讓細(xì)胞懸液流入板孔中,培養(yǎng)的細(xì)胞基本是均勻生長(zhǎng)。記住千萬不要用振蕩器振蕩,否則你的細(xì)胞就會(huì)聚積在一起。
還有些可行的處理方法:加入前吹打均勻;從多孔板側(cè)邊或底邊緩慢加入。在進(jìn)行原代培養(yǎng)時(shí)遇到該現(xiàn)象,可能有些人以為培養(yǎng)皿鋪膠不均勻會(huì)導(dǎo)致這種現(xiàn)象,因?yàn)榛靹虻难芏渭尤氲脚囵B(yǎng)皿中時(shí),在顯微鏡下血管段均勻分布在培養(yǎng)皿中,二十四小時(shí)后貼壁的血管段就是周邊多,中間相對(duì)少些。
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